میکروسکوپ چیست؟
میکروسکوپ ابزاری است که می توان از آن برای مشاهده اجسام کوچک حتی سلول ها استفاده کرد. تصویر یک جسم حداقل از طریق یک عدسی در میکروسکوپ بزرگنمایی شده و این عدسی نور را به سمت چشم منحرف می کند و جسم را بزرگتر از آنچه هست نشان می دهد.
میکروسکوپ چگونه کار می کند؟
نور منبع نور توسط کندانسور جمع آوری شده و بر روی نمونه قرار داده شده روی لام متمرکز می گردد. نوری که از نمونه عبور می کند سپس از عدسی های شیئی با بزرگنمایی های متفاوت عبور کرده و در نهایت از طریق لنز چشمی عبور می کند و به چشم ناظر می رسد بزرگنمایی های عدسی های شیئی و چشمی در هم ضرب شده و تصویری که ناظر می بیند شامل تصویر با بزرگنمایی فوق الذکر می باشد نمونه می تواند با رنگ آمیزی یا بی رنگ باشد.
-انواع میکروسکوپ:
میکروسکوپ های نوری یا اپتیکی در سه دسته بندی ایستاده یا Upright و معکوس inverted و استریو میکروسکوپ stereo microscope طبقه بندی می گردند .
میکروسکوپ upright
در این نوع از میکروسکوپ ها ، منبع نور و کندانسور در زیر صفحه استیج مکانیکی یا شاریو قرار گرفته اند و رو به بالا می باشند. نمونه ها بر روی لام بر روی شاریو قرار داده شده و لنزهای شیئی و هد در قسمت بالای صفحه مکانیکی هستند.
میکروسکوپ های اینورت یا معکوس inverted
در یک میکروسکوپ معکوس، منبع نور عبوری و کندانسور در بخش فوقانی (شاریو) استیج مکانیکی تعبیه شده اند و لنزهای شیئی در زیر استیج مکانیکی جای گذاری شده اند .یک میکروسکوپ معکوس شبیه به یک میکروسکوپ عادی است، اما اجزا آن در یک پیکربندی معکوس قرار گرفته‌اند بنابراین میکروسکوپ معکوس یا اینورت نامیده می‌شود.
۰۲۱-۸۸۸۲۶۶۲۶
۰۹۱۲۲۴۳۶۰۹۴
۰۹۳۵۲۴۳۶۰۹۴
استریو میکروسکوپ
میکروسکوپ استریو با استفاده از نور منعکس شده از روی نمونه مورد مشاهده کار می کند. بزرگنمایی استریومیکروسکوپ در بازه بین ۱۰ تا ۲۰۰ برابرانجام می شود و از این رو برای بزرگنمایی اجسامی که نور از آنها عبور نمی کند مناسب است. استریو میکروسکوپ ها در دو نوع -پله ای :که معمولا دارای دو یا سه بزرگنمایی بصورت ثابت هستند و
زومیک zooming که در بازه ای خاص بزرگنمایی دارند مثل ۴ تا ۴۰ برابر یا .....
تکنیک های عبور نور در میکروسکوپها:
فازکنتراست:
عامل اصلی برای دیده شدن تغییرات فاز در میکروسکوپهای فازکنتراست جدا کردن نور روشن کننده (پس زمینه) از نور تابیده شده به نمونه (که جزئیات پیش زمینه را تشکیل می دهد) و ایجاد تفاوت بین آنهاست.میکروسکوپ فازکنتراست جهت دیدن موارد زیستی شفاف، فاقد رنگ، بدون رنگ آمیزی و زنده استفاده می گردد.
میکروسکوپهای phase عموما یک سیستم نوری با طراحی خاص می باشند که دارای بخش های اصلی سیستم فاز بوده و علاوه بر آن دارای صفحه فاز حلقوی و دیافراگم حلقوی نیز می باشند.
قطعات میکروسکوپ فاز:- پلیت فاز کنتراست
- دیافراگم حلقوی
نابش نور بصورت مستقیم از شیار حلقوی عبور کرده در حالی که تابش نور پراکنده شده از ناحیه خارج از شیار می گذرند بسته به ضرایب انکساری متفاوت قسمت های یک سلول، جسم مورد مشاهده درجه متفاوتی از کنتراست را در این نوع از سیستم نوری به مشاهده کننده ارائه می کند.
- لنزهای شیئی فاز کنتراستPH
سیستم نوری دارک فیلد
میکروسکوپهای دارک فیلد دارای روشی هستند که از پرتوهای زاویه دار جهت افزایش کنتراست در مواردی که در شرایط نور عادی تصویر مناسبی ارائه نمی کنند استفاده می نمایند.
پس از انسداد نور مستقیم بوسیله یک فیلتر غیرشفاف که در کندانسور تعبیه می شود، پرتوهایی که از زوایای مایل از نمونه عبور می‌کنند، پراکنده، شکسته شده و به درون لنز شیئی objective منعکس می نماید تا تصویری روشن از نمونه که روی یک پس‌زمینه تاریک قرار گرفته است، تشکیل گردد.
پس‌زمینه تیره کنتراست بالایی داشته و نمونه‌هایی که پس‌زمینه غیرقابل مشاهده ای را دارند قابل مشاهده تر می گردد.
سیستم دارک فیلد و فازکنتراست عموما همراه با هم ارائه می شوند.
سیستم نوری اپی فلورسنت epi flourscent یا فلورسنت
در این نوع از microscpe نمونه با نوری با طول موج (یا طول موج‌های) خاص که توسط فلوروفورها جذب می‌شود، روشن می‌شود و باعث می‌شود آنها نوری با طول‌موج‌های طولانی‌تر (یعنی رنگی متفاوت از نور جذب‌شده) ساطع کنند. اجزای معمول یک میکروسکوپ فلورسانس عبارتند از : منبع نور (لامپ قوس زنون یا لامپ بخار جیوه و اشکال پیشرفته‌تر عبارتند از LEDها و لیزرهای پرقدرت)، فیلتر تحریکexcit، آینه دو رنگ (یا شکافنده دو رنگ) و فیلتر انتشار.
اکثر میکروسکوپ های فلورسانس مورد استفاده، میکروسکوپ های اپی فلورسانس هستند، که در آن تحریک فلوروفور و تشخیص فلورسانس از طریق همان مسیر نوری (یعنی از طریق شی) انجام می شود. این میکروسکوپ ها به طور گسترده در زیست شناسی مورد استفاده قرار می گیرند و اساس طراحی های پیشرفته تری مانند میکروسکوپ کانفوکال و میکروسکوپ فلورسانس بازتاب داخلی کل (TIRF) هستند.
قطعات سیستم اپی فلورسنت
-Dichloric mirror آینه دورنگ: فیلتر با پوشش لایه نازک ویژه جهت عبور انتخابی طیف خاصی از رنگ ها و منعکس کردن بقیه موارد.
-Excitation filter فیلتر تحریک کننده:
فیلتر تحریک فقط به یک نوار باریک از طول موج ها اجازه می دهد تا از آن عبور کنند، در حدود پیک طول موج تحریک فلوروفور. به عنوان مثال ناحیه باند مربوط به انتقال بیش از 90 درصد برای فیلتر تحریکی پروتئین فلورسنت زرد (YFP) (MF497-16) 489 - 505 نانومتر است. پرتوتابشی خارج از این محدوده (برای مناطق نزدیک منطقه انتقال) یا به طور کامل (برای مناطق دورتر از ناحیه باند گذر) توسط فیلتر مسدود می شود.
-Emission filter فیلتر انتشار
هدف یک فیلتر انتشار است که اجازه می دهد نور فلورسانس مطلوب از نمونه به آشکارساز برسد در حالی که آثار ناخواسته نور تحریک را مسدود می کند. مانند فیلتر تحریک، این فیلتر فقط به یک نوار باریک از طول موج ها اجازه می دهد تا از آن عبور کنند، در اطراف پیک طول موج انتشار فلوروفور. به عنوان مثال، ناحیه باند گذر مربوط به انتقال بیش از 90 درصد برای فیلتر انتشار پروتئین فلورسنت زرد (YFP) (MF535-22) 524 - 546 نانومتر است. تابش تابشی خارج از این محدوده یا به طور جزئی (برای مناطق نزدیک منطقه انتقال) یا به طور کامل (برای مناطق دورتر از ناحیه باند گذر) توسط این فیلتر مسدود می شود.
۰۲۱-۸۸۸۲۶۶۲۶ (۶خط)
-انواع لنزهای شیئی فلورسنت (آبجکتیو)
آبجکتیو میکروسکوپهای فلورسانس ابتدا به عنوان یک کندانسوری که به خوبی تصحیح شده عمل کرده و در مرحله دوم به عنوان جمع کننده نور تشکیل دهنده تصویر عمل می کنند. و همیشه با کندانسور دستگاه دقیقا هم راستا هستند.آبجکتیوهای مزبور از جنس کوارتز و بروسیلیکات خاص ساخته می شوند که توانایی عبور پرتوهایی بالاتر از U.V را دارند و معمولا با کد flour شناخته می شوند.
میکروسکوپ های پلاریزان POLARIZATION MICROSCOPE:
سیستم اپتیکی پلاریزان، دستگاههایی با ویژگی های معمول با خصوصیاتی ویژه می باشند. که توانایی بزرگنمایی بالای نمونه ها را در شرایط نوری پلاریزه را ایجاد می‌کنند. منبع نور یا لامپ های این دستگاهها معمولا دارای فیلترهای پلاریزان می باشند.
ازمیکروسکوپ های پلاریزان جهت بزرگنمایی نمونه های معدنی، مواد دارویی، مواد آلی و معدنی ، انواع سنگ و نمونه های زمین شناسی بهره برداری می شود. در بخش زیرین لنزهای چشمی بدنه میکروسکوپ پلاریزان ، تیغه برتراند قرار می گیرد که توانایی چرخس به سمت بیرون یا خارج از محور لوله را دارا می باشد. تیغه ۱/۴ لاندا و تیغه کوارتز جهت امور تجزیه و تحلیل در این نوع از میکروسکوپ ها استفاده می گردند.
صفحه های جبران کننده compensator و retardation در اکثر میکروسکوپ های پلاریزان قرار داده می شوند که جهت ایجاد تفاوت مسیر نوری در نمونه استفاده می گردند.
میکروسکوپ های دارای نور پلاریزه مجهز به صفحه چرخان گرد مدرج می باشند که بعنوان استیج مکانیکی در این نوع از میکروسکوپ کار می کنند.
میکروسکوپ متالوگرافی
میکروسکوپ های متالوگرافی برای شناسایی عیوب در سطوح فلزی، تعیین مرز دانه های کریستال در آلیاژهای فلزی و مطالعه سنگ ها و کانی ها استفاده می شود. این نوع میکروسکوپ از روشنایی عمودی استفاده می کند که در آن منبع نور با استفاده از یک تقسیم کننده پرتو به داخل لوله میکروسکوپ زیر چشمی وارد می شود. نور از طریق شیء به پایین می تابد و از طریق شیء بر روی نمونه متمرکز می شود. نور منعکس شده یا پراکنده شده به سمت هدف، سپس تصویر در چشمی دیده می شود. به این ترتیب اجسامی که نور از آنها عبور نمی کند مانند فلزات را می توان زیر میکروسکوپ بررسی کرد. چنین سیستم هایی در علم پزشکی قانونی و میکروسکوپ تشخیصی نیز کاربرد دارند.
تلفن:
۰۲۱-۸۸۸۲۶۶۲۶
۰۹۱۲-۲۴۳-۶۰-۹۴
۰۹۳۵-۲۴۳-۶۰-۹۴
۰۹۳۰-۱۴۳-۶۰-۹۴
